肉的宰后嫩化基本归因于肌原玻璃人造合成纤维格局的伤害，肌原玻璃人造合成纤维格局是由内源性血清淀粉酶酶质脂肪酸质水解酶分解肌原玻璃人造合成纤维和肿瘤上皮组织膜骨架血清有的。与两百多年来直是关注新闻主角的钙血清酶有差异，胱天血清酶（caspases）在最近这一段时间称得上感关注的情况下题。胱天血清酶在肿瘤上皮组织膜凋亡的强制执行过程起着至关首要的效应，其中的caspase-3在人死之后血清淀粉酶酶质脂肪酸质水解中的效应是多多面和复杂的的，以至于指的进十步探析。S-亚硝基化实现设定钙解放、体力基础代谢、血清质分解和肿瘤上皮组织膜凋亡来设定口感，收录嫩度和持水学习能力。的早期探析出现 S-亚硝基化能够下降依赖感线粒体的caspase-3级联反馈，这有机会是手臂肌肉肿瘤上皮组织膜凋亡和牛羊肉品行波动的情况。caspase-3的探析侧重是其与肿瘤上皮组织膜凋亡的的关联，其实，极少有探析研究方案S-亚硝基化设定caspase-3的体系。

2024年9月由深圳草业上大学张万刚讲师队伍在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱菌物为该研究提供了亚硝基化呈现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文名副标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2026年影向指数：5.7

文章发表时光：2024年9月

买家单位名称：南京农业大学

分析资料：蛋白

拜谱保证技术性：亚硝基化修饰组学

新技术的路线：

一、实验数据

01.Caspase-3活力

当下尚不明了NO对caspase-3的控制作而成用有没归因于NO介导的S-亚硝基化，不同于氨水浓度均值的GSNO身为外源性NO厂家直销，以引导caspase-3的身体外S-亚硝基化。结局意味着，与无GSNO的组相信，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力重要减低（图1），与原先有关资料同步。GSNO治理 减低caspase-3活力的因素病因仍尚待展现。

图1 与众不同浓硫酸浓度的GSNO解决对caspase-3灵活性的关系

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化能力

实验Caspase-3的亚硝基化地步，以阐发GSNO对Caspase-3的反应迟钝性。经GSNO办理后，在线检查测量到caspase-3淀粉酶S-亚硝基化密度添加（图2）。许多成果揭示，外源性GSNO塑造培养可取得胜利引发caspase-3的离体S-亚硝基化。最让人特别的是，在没GSNO来源于的对比组中在线检查测量到某个不大的S-亚硝基化带，这揭示caspase-3将会会发生内源性的S-亚硝基化。最后，本实验中caspase-3的S-亚硝基化地步较高，而caspase-3的生物较低，这与过后的实验统一。其实，caspase-3的活性朋友S-亚硝基化呈现位点尚不清晰，还都要进十步的研究。

图2 GSNO治理对caspase-3S-亚硝基化平行的危害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化掩盖组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码编码序列。粉色标示图片的编码编码序列带表S-亚硝基化肽，色标示图片的C带表S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3降解塑料结球蛋白

结淀粉酶质质用作本身注重的内部骨架淀粉酶质质，在保证肌内部组成部分的组成部分完正详细性和收缩毛孔性上起着注重的能力，探究S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶质质化学吸附的的敏单纯具备着注重意议。与Std（未用胱天淀粉酶质质酶-3和GSNO孵育的起始肌棉纤维材料淀粉酶质质）组优于，0 μM GSNO组（肌原棉纤维材料和caspase-3的孵育，无GSNO）的完正详细结淀粉酶质质含氧量偏态大幅度降低，表示caspase-3对结淀粉酶质质具备着内在的淀粉酶质质水解反应的能力。在GSNO孵育后，完正详细结淀粉酶质质的含氧量看不出延长（P < 0.05）。另外，当GSNO氧化还原电位提升时，完正详细结淀粉酶质质的含氧量长期上浮（P < 0.05）（图5）。这一个显示证明，SNO淡化的caspase-3以关卡依赖症的方试克制结淀粉酶质质的化学吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3溶解结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3挥发肌钙蛋白质-T

肌钙血清-T (TnT)是原肌球血清转换负责任背部肌肉收縮的细条的必需品肌原弹性棉黏胶纤维血清。TnT的化学生物吸附特性是查重到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化的条件下，caspase-3对TnT的化学生物吸附情况报告如下图6随时，与Std组（不会有caspase-3和GSNO的肌原弹性棉黏胶纤维）相对来说，caspase-3组中30 kDa TnT场面相关系数曾加，反映出caspase-3参与者了TnT的化学生物吸附，还有就是，caspase-3与GSNO的孵育导至30 kDa TnT骤降。在100和200 μM GSNO组中不会有查重到严重的差别(P > 0.05)，而当GSNO的酸度达成400 μM 时，该场面相关系数减低(P < 0.05)。这样出现反映出了SNO体现的caspase-3对TnT化学生物吸附的抑止目的。结血清和TnT是caspase-3的的敏感底物，而GSNO进行处理较低caspase-3的特异性或者导至肌原弹性棉黏胶纤维血清化学生物吸附情况较低。上面所论，NO成脂的S-亚硝基化需要根据体现半胱氨酸残基来转换caspase-3的特异性，因此进第一步引响其对结血清和TnT的血清油脂水解力量，而使引响羊肉质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3降解塑料肌钙蛋白质-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本研究试论旨在通过试论S-亚硝基化对caspase-3绘制的印象下列关于接下来对羊肉片肌原食物纤维棉身体外光降解的印象。血清S-亚硝基化行绘制caspase-3的半胱氨酸残基，最后引致caspase-3灵活性减少，进步抑制性了其对羊肉片肌原食物纤维棉血清的血清溶解专业能力。

三、拜谱工作小结

深入定量分析通过了酶活核查，亚硝基化呈现组学定量分析，WB等测量长效机制，发觉蛋清S-亚硝基化能够呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这造成了caspase-3渗透性的拉低，齐头并进一点调节了其对牛羊肉肌原黏胶纤维蛋清的蛋清血清质水解特性。本深入定量分析为表示蛋清质亚硝基化对肉质地的自我调节长效机制展示了了个新的焦距。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、绘制血清质组学、代谢转化组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系类软件，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total被氧化恢复备份、氧化钙含量巯基，欢迎大家咨询！

学习文献综述：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663